Las modificaciones moleculares que se producen durante la capacitación espermática están asociadas con cambios en la membrana plasmática, eventos metabólicos y modificaciones postraduccionales. Este proceso incluye:

1. Pérdida de colesterol de la membrana plasmática;
2. Cambios en la concentración de iones intracelulares;
3. Aumento del pH intracelular e hiperpolarización de la membrana plasmática;
4. Activación del movimiento del flagelo, cambios en el patrón de movimiento (hiperactivación);
5. Fosforilación de proteínas en residuos de tirosina;
6. Adquisición de la capacidad para llevar a cabo la reacción acrosómica estimulada por un agonista fisiológico.

Curiosamente, todos estos eventos se regulan a través del sistema AMPciclico (cAMP)/proteína quinasa A (PKA). La PKA es una de las Ser/Thr quinasas más frecuentes presentes en el flagelo de espermatozoides de mamíferos. La PKA fosforila varias proteínas en los residuos Ser y Thr, activando, directa o indirectamente, varias proteínas quinasas y/o inhibiendo fosfatasas, lo que finalmente producirá un aumento en la fosforilación de los residuos de Tyr.

Sin embargo, también induce un aumento en la fosforilación de la tirosina durante la capacitación espermática, mediante la activación indirecta de tirosin quinasas. Estudios en espermatozoides de verraco han demostrado que la PKA está implicada en la inducción de cambios rápidos tanto en motilidad como en la arquitectura de lípidos de membrana plasmática.

Existen algunos estudios que muestran el efecto del fluido oviductal sobre la fosforilación de la proteína espermática en condiciones de capacitación de espermatozoides y además se ha demostrado que dos vías paralelas regulan los eventos de fosforilación que conducen a la capacitación: la de la PKA, y la otra que requiere la inactivación de ser/thr fosfatasas. Sin embargo, no existen estudios que relacionen las secreciones de fluidos foliculares y oviductales o de células del cúmulo sobre la actividad de PKA durante la capacitación de espermatozoides y la fecundación in vitro en cerdos.

El objetivo general de este trabajo será evaluar el efecto de los fluidos oviductales, fluido folicular y secreciones de las células del cumulus sobre la fosforilación de proteínas, reacción acrosómica y fecundación in vitro en cerdos, además se investigará si el efecto de estos fluidos sobre la fosforilación de proteínas es un proceso reversible durante la capacitación. Para cumplir con nuestro objetivo de trabajo, enfocamos nuestro estudio desde tres diseños experimentales.

1. Evaluar de forma aislada el efecto de cada uno de los fluidos oviductales de las diferentes etapas del ciclo estral de la cerda, con el fin de conocer el efecto de cada uno de estos fluidos por sí solo.
2. Desde un punto de vista fisiológico, evaluar los espermatozoides una vez en el oviducto toman contacto con diferentes fluidos los cuales podrían estar modulando la función espermática y la adquisición de la capacidad fecundante.
3. Determinar si el efecto de estos fluidos es reversible durante la capacitación.