Amígdala y exones crípticos: neuropatología, estrés e inflamación, con dimensión de género.
Se pretende estudiar el papel de la amígdala (y de sus subregiones) en diferentes patologías que cursan con demencia. Para ello, se realizarán:
- estudios morfológicos;
- determinación de biomarcadores en líquido cefalorraquídeo;
- análisis moleculares,
- de marcadores de estrés emocional y
- exones crípticos de proteínas.
Estos cuatro pilares se tratarán de forma transversal con dimensión de género (sexo biológico) y de edad, estableciendo ambos aspectos como variables independientes.
Estudio Morfológico
Se realizará un profundo estudio anatómico de la amígdala con subdivisión de las regiones amigdalinas, estableciendo sus tamaños, conexiones y relaciones. Se establecerá una línea de estudio para establecer las diferencias que se puedan encontrar en función de la edad (envejecimiento) y del sexo biológico.
Además, se realizará estudio cuantitativo de patología mediante técnicas de inmunohistoquímica para TPD-43 y para alfa-sinucleína con el objetivo de establecer estadiaje regional y temporal intraamigdalino para cada patología.
Por último, el estudio de neuroinflamación mediante inmunohistoquímica (CD68, Iba1 y GFAP) permitirá determinar la activación de la glia (microglía y astroglia) a nivel de cada subnúcleo.
Estudio de Biomarcadores en Líquido Cefalorraquídeo
Se buscarán aquellos marcadores de proteínas que se han descrito relacionados directamente con procesos de neurodegeneración, como son la Proteína Ácida Glial Fibrilar (GFAP) (marcador de inflamación) y los neurofilamentos (NFL) (marcador de daño neuronal). Estos marcadores, en relación con el estudio histológico y clínico, permitirá determinar los niveles que asocien patología y, por tanto, podrán ser utilizados en el manejo diagnóstico precoz y clínico de los pacientes.
Estudio Molecular sobre Tejido Congelado de Amígdala
Se enfrentan dos objetivos diferentes: 1.- Análisis de los marcadores de estrés emocional (receptores de CRF y glucorticoides) que se han descrito implicados en procesos de neurodegeneración. Al ser la amígdala una estructura cerebral intensamente relacionada con los instintos, la supervivencia y las emociones, así como un lugar indudable de interacción entre proteínas patológicas en diferentes tipos de demencias, el papel del estrés emocional puede correlacionarse con la aparición de rasgos neuropatológicos y proteínas alteradas propias de las patologías neurodegenerativas que cursan con demencia; 2.- En ese sentido se analizarán la aparición y distribución de las proteínas TDP-43 y alfa-sinucleína mediante qRT-PCR e inmunoensayos de exones crípticos no conservados.
Correlaciones entre los Datos Obtenidos
Se establecerán correlaciones entre los datos obtenidos de los cuatro pilares del proyecto.