Los bifosfonatos son análogos estables de los pirofosfatos inorgánicos que tienen una gran afinidad por el calcio y que han demostrado su eficacia en el tratamiento de diversas patologías.

Objetivos

1. Evaluar los efectos citotóxicos y genotóxicos de ibandronato y ác.zoledrónico aislados o en combinación con radiación ionizante (RX) para evaluar un posible efecto sinérgico entre ambas terapias.
2. Determinar un posible efecto protector del ácido carnósico, ácido rosmarínico y apigenina potásica frente al efecto citotóxico y genotoxico de los bifosfonatos estudiados; que podría permitir la disminución de los efectos tóxicos secundarios asociados a su administración.
3. Determinar un posible efecto radiosensibilizante de los bifosfonatos que permita explicar algunos de los efectos citotóxicos descritos tras la administración de radiación ionizante (RX) en pacientes oncológicos o en mujeres con osteoporósis.

Material y métodos

1. Estudio de genotoxicidad

Para ello se utilizará la técnica de micronúcleos en cultivos de linfocitos humanos irradiados y bloqueados citocinéticamente con Cytochalasina B en su primera división mitótica, descrito por Fenech y considerado como el procedimiento más adecuado para el análisis citogenético del daño genotóxico inducido por cualquier agente mutagenico (IAEA, 2001).

• muestras controles no irradiadas
• muestras controles irradiadas
• muestras tratadas no irradiadas
• muestras tratadas preirradiación
• muestras tratadas postirradiación

Los bifosfonatos estudiados se administraran a una concentración de 20µM y seran: ibandronato y ac.zoledrónico

En todos los casos las sustancias ensayadas se administraran antes (preirradiación) y después (postirradiación) de la exposición a radiación ionizante.

2. Estudio de Citotóxicidad

Se realizara mediante el tedt de proliferacion celular con MTT y consiste en dos tipos de ensayos: a 24 y 48 horas tras haber aplicado el tratamiento y/o la radiación X, para valorar el efecto de los bifosfonatos sobre la viabilidad celular e inhibición del crecimiento de los cultivos celulares.

Vamos a utilizar la técnica descrita por Carmichael et al. (1987a; 1987b) y por Alley et al. (1988), adaptada a nuestras condiciones de cultivo (Vicente, 1997), para cuantificar la viabilidad celular

• Ibandronato
• Ác.Zolendrónico

Además de ensayar estas sustancias de manera individual, realizaremos la combinación de las anteriores con las siguientes sustancias para determinar su posible efecto protector: Ac.Carnósico, Ac.Rosmarínico y Apigenina

Utilizaremos dos líneas celulares: una tumoral TRAMP C1 de próstata de ratón y otra línea de células normales, las PNT2 de próstata humana.