Alteraciones proteómicas y genómicas en el entorno oviductal de la cerda en presencia de espermatozoides x o y.
En la actualidad existe un intenso debate sobre el papel desarrollado por la madre en la determinación del sexo en la descendencia. Cada vez son más las evidencias evolutivas que sugieren que la madre puede desarrollar una influencia decisiva sobre el sexo de la descendencia.
Diferentes publicaciones han mostrado que determinados factores como la dieta, el entorno, el estrés, etc. pueden influir significativamente en el porcentaje de hembras y machos en la progenie (Revisado por Navara y Nelson, 2009; Grant y Chamley, 2010).
Sin embargo, los mecanismos mediante los cuales la madre puede condicionar el sexo de la descendencia no son conocidos. Entre las hipótesis planteadas, se sugiere que los ovocitos permitirían la fertilización en función del cromosoma sexual presente en el espermatozoide (X o Y), o bien, mediante mecanismos que permitirían la supervivencia de los embriones en función de su sexo. Nuevos estudios son necesarios con el objeto de esclarecer estas y otras incógnitas.
Objetivos del Proyecto
- Los espermatozoides sexados serán capaces de originar cambios en el perfil genómico y proteómico del oviducto (en relación a lo observado en presencia de espermatozoides no sexados).
- Los presencia de espermatozoides X e Y provocará diferentes respuesta genómica en el oviducto.
Metodología
El objetivo principal perseguido en este proyecto es el desarrollo de un modelo en la especie porcina para el estudio de estas hipótesis, para lo cual será necesario determinar los cambios en el ambiente oviductal en presencia o ausencia de espermatozoides. Posteriormente, se procederá al estudio de las alteraciones proteómicas y genómicas en el oviducto como respuesta a la presencia de espermatozoides sexados (X e Y) en relación a lo observado con espermatozoides no sexados.
Al menos 6 replicados y durante un periodo no inferior a un año, grupos de 5-6 cerdas serán distribuidas en tres grupos experimentales en función del tipo de espermatozoides empleados en la inseminación laparoscópica. Posteriormente dichas cerdas serán intervenidas quirúrgicamente para la obtención de las muestras necesarias en la determinación de los perfiles proteómicos y genómicos.
Grupos Experimentales
- Grupo Experimental 1. Cerdas inseminadas con espermatozoides X en el oviducto e Y en el oviducto contrario (10 cerdas).
- Grupo Experimental 2. Cerdas inseminadas con espermatozoides sometidos a separación por citometría de flujo (X e Y) en oviducto y con espermatozoides no sexados en el oviducto contrario (10 cerdas).
- Grupo Experimental 3. Cerdas inseminadas con espermatozoides no sexados en el oviducto e inoculadas con diluyente sin espermatozoides en el oviducto contrario. (Control; 10 cerdas).
Resultados Esperados
Con este experimento esperamos poder realizar la identificación de cambios en el perfil proteico y de expresión génica en el tracto reproductor femenino de la cerda que demuestre la existencia de mecanismos de regulación del sexo de la descendencia. De este conocimiento podrán extraerse valiosas aplicaciones que nos permitan interferir y regular dichos mecanismos, con el objetivo de obtener camadas del sexo deseado así como mejorar los resultados de otras tecnologías como la preselección del sexo por citometría de flujo. En la actualidad, no existen estudios similares en la especie porcina y es poca la literatura disponible que recoja estudios parecidos en otras especies en las que se haya realizado un diseño similar para estudiar las diferencias en la respuesta maternal a espermatozoides X o Y.