El desarrollo de esta Tesis Doctoral se centra en la obtención de dos proteínas recombinantes (oviductina (OVGP-1) porcina y bovina) con conocido efecto en distintos mecanismos relacionados con la fecundación y el bloqueo de la polispermia para la futura producción de medios de cultivo que mejoren los resultados actuales de fecundación in vitro y cultivo embrionario en estas especies. Varios estudios han demostrado que las secreciones oviductales son capaces de regular la fecundación y en particular procesos como la unión del espermatozoide a la zona pelúcida y el desarrollo embrionario temprano. Sin embargo, los mecanismos moleculares en los que participan las secreciones oviductales no han sido esclarecidos en su totalidad.

En un estudio previo hemos demostrado que en las secreciones oviductales se encuentra una proteína denominada OVGP1 que está implicada en el endurecimiento de la ZP y que produce un relevante incremento de la monospermia usando técnicas de FIV.

La producción de una OVGP-1 recombinante activa en las especie porcina y bovina nos permitirá obtener unos rendimientos más altos en técnicas de fecunadación in vitro y cultivo embrionario. Además, la producción de estas proteínas nos permitirá esclarecer la función concreta que tienen las mismas en los procesos reproductivos, aún no totalmente esclarecida.

El papel desempeñado por cada una de las partes de la proteína se estudiará mediante la producción de proteínas recombinantes truncadas y se analizará la importancia de la glicosilación mediante técnicas de deglicosilación.

Para todo ello se utilizarán diversas técnicas de biología molecular como clonación, transfección transitoria y estable en células de mamífero y bioquímicas como electroforesis y western-blot. Los ensayos de funcionalidad se desarrollarán mediante incubación de las proteínas con ovocitos porcinos y bovinos en ensayos de fecundación in vitro y cultivo embrionario. La obtención de proteínas recombinantes cuya actividad mejore la eficacia de las técnicas de reproducción asistida sería un importante resultado que además podría abrir nuevos campos de aplicación de estas proteínas en otras especies.