Estudio de la implicación del sistema plasminógeno-plasmina en el proceso de fecundación en la especie murina
El sistema plasminógeno-plasmina (PLG-PLA), también conocido como sistema fibrinolítico, es un componente clave en la disolución de coágulos sanguíneos y también interviene en procesos de remodelación tisular, migración celular y angiogénesis. El plasminógeno (PLG) es el componente central de este sistema.
Este componente ha sido detectado en diversos fluidos corporales como suero sanguíneo, líquido peritoneal, fluido oviductal y plasma seminal. Recientemente, se ha propuesto un modelo de actuación del sistema PLG-PL en el proceso de fecundación en especies porcina y bovina.
Según este modelo, el sistema PLG-PL es un mecanismo complejo que actúa regulando la entrada de los espermatozoides al ovocito mediante la formación de plasmina (PL), la forma activa del PLG. Estudios en grandes animales han demostrado esta implicación, aunque existe cierta controversia en la literatura basada en el modelo murino.
Objetivos del estudio
El objetivo principal de este estudio es evaluar la implicación del sistema PLG-PL en la fecundación murina. Se proponen tres objetivos específicos con cuatro grupos experimentales:
- Grupo control: gametos sin ningún tipo de tratamiento.
- Grupo PLG: gametos incubados con PLG exógeno.
- Grupo inhibidores: gametos incubados con inhibidores del sistema PLG-PL.
- Grupo activadores: gametos incubados con activadores del sistema PLG-PL.
Objetivos específicos
1) Evaluación de la motilidad espermática mediante el sistema informático CASA y el estudio de la capacitación espermática mediante el análisis por western-blot de la fosforilación de la tirosina.
2) Análisis de la reacción acrosómica (RA). Para ello utilizaremos ratones transgénicos que expresan una proteína verde fluorescente en su acrosoma cuando este se encuentra intacto, mientras que al reaccionar el acrosoma pierde dicha fluorescencia. Además se analizará el lugar donde se produce la RA en el ovocito (células del cúmulus, zona pelúcida o membrana plasmática).
3) Fecundación in vitro. Se evaluaran las tasas de división embrionarias en los diferentes grupos experimentales.