07/09/2001
Francisco J. Murillo Araújo y Marta Fontes Bastos
Genética Molecular
Genética y Microbiología
Facultad de Biología
Universidad de Murcia
Murcia
España
El gen carD de Myxococcus xanthus participa en la activación de dos promotores inducibles por la luz, los promotores de los genes carQRS y crtI. CarD también es necesario para la activación de varios genes específicos del desarrollo. El extremo carboxilo de la proteína CarD contiene un dominio de unión al DNA descrito previamente sólo en organismos eucarióticos, como es el caso de la proteína HMGA humana, que se encuentra asociada a la cromatina. La unión de HMGA a sus sitios específicos en el DNA regula la activación de distintos promotores, participando en una gran variedad de procesos biológicos. Esto llevó a pensar que carD determina una proteína que actúa sobre un amplio espectro de genes, participando posiblemente en otros procesos de M. xanthus, aparte de la carotenogénesis y el desarrollo multicelular.
En este trabajo, se han analizado 613 promotores vegetativos de M. xanthus con el objeto de identificar nuevos promotores cuya actividad se ve afectada por la mutación carD. Se encontraron así seis promotores que vieron afectada su actividad de forma significativa, escogiéndose cuatro para su estudio posterior. La clonación y secuenciación de los genes correspondientes ha revelado que, entre ellos, se encuentra una proteína de bombeo de toxinas, un receptor de membrana dependiente de TonB, siendo el caso más interesante un factor transcripcional global con caracterísiticas arquitectónicas, la proteína Lrp. También se ha estudiado la relación funcional de CarD con otras proteínas reguladoras de la carotenogénesis que participan con él en la activación de un promotor de la carotenogénesis, CarQ e IhfA, con respecto a la activación de los promotores identificados en el trabajo. Por último, con el fin de identificar productos génicos relacionados funcionalmente con CarD, se ha realizado una búsqueda de mutaciones supresoras de mutaciones carD. Para dicha búsqueda se ha utilizado un promotor muy afectado por la mutación carD y posteriormente se ha analizado el efecto de las distintas mutaciones supresoras sobre varios promotores dependientes de CarD.
